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培養(yǎng)液的更換
來(lái)源: | 作者:和諾 | 發(fā)布時(shí)間: 2014-11-04 | 1294 次瀏覽 | 分享到:

1.紫外消毒30min后關(guān)閉紫外燈,開(kāi)啟超凈臺(tái)正常工作狀態(tài),用酒精消毒操作者的雙手。

2.將所需的培養(yǎng)基確保瓶身干凈后放于工作臺(tái)面內(nèi),點(diǎn)燃酒精燈,將培養(yǎng)基瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對(duì)準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次,旋開(kāi)瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上,瓶口對(duì)準(zhǔn)酒精燈,且放在距離酒精燈最近的位置,瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。

3. 將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次,旋開(kāi)后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次,瓶蓋放于酒精燈右側(cè)后將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液懸空倒進(jìn)污缸,在酒精燈消毒2-3次瓶口,

4.拿出1支高壓后的5ml定量移液管,在酒精燈上灼燒尾部后裝于電動(dòng)移液器上,再次放于酒精燈上灼燒整個(gè)定量移液管管身2-3次,懸空進(jìn)入培養(yǎng)基瓶?jī)?nèi)吸取4ml培養(yǎng)基再懸空移入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶瓶口和瓶蓋在酒精燈上消毒2-3次后擰緊平放。

5.將培養(yǎng)基瓶口和瓶蓋消毒2-3次后擰緊,熄滅酒精燈,整理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,取出實(shí)驗(yàn)試劑及污缸等,關(guān)閉超凈工作臺(tái)。

6. 將培養(yǎng)瓶放于28℃,5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),旋開(kāi)瓶口少許。

   每天定時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,一般72-96h后,細(xì)胞生長(zhǎng)密度大于90%,即可進(jìn)行細(xì)胞的傳代。