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抗體保存指南
來源: | 作者:和諾 | 發(fā)布時間: 2014-11-04 | 589 次瀏覽 | 分享到:

    首先請謹(jǐn)記!無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確保存抗體!

1. 收到抗體后請務(wù)必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)!
Abcam
的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心1-5分鐘才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導(dǎo)致離心不完全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
2. 
對于Abcam大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 or -80。

o對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20是完全足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80會有更多的好處!

o分裝可以最大程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。

o分裝的量以一次實驗用完為好,最少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響

o復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4,避免再凍起來!

o抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4盡量不要超過1天。

o絕對避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上


3. 
大部分抗體收到后4短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。

如果抗體很快(1-2周)會使用,推薦在4保存,這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則最好是在-20 or -80。最關(guān)鍵的一點是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體!

但是,腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來!因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4oC保存會導(dǎo)致抗體的降解!


4. 
大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2周的時間,所以是在4的條件下來完成的。

 4運輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中絕對避免干冰運輸!

特殊抗體的保存條件:

·酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4,避免凍起來。否則會導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失

·偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!

·IgG3的同型對照:永遠(yuǎn)保存在4,避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體

無論是保存還是運輸,絕對避免反復(fù)凍融!

反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!

抗體保存其它相關(guān)信息:

關(guān)于加入甘油保存:

有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融,甘油在-20會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩(wěn)定性;而Abcam只對按照推薦條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80保存,因為這已經(jīng)超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹(jǐn)慎注意無菌操作,避免污染!